Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表
簡(jiǎn)要描述：
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表達(dá)分析，是一款專門設(shè)計(jì)用于酵母轉(zhuǎn)化和文庫(kù)篩選的試劑盒，比目前商業(yè)或公開的文獻(xiàn)方法更快捷和更有效。本試劑盒制備的酵母細(xì)胞可立即用于轉(zhuǎn)化或凍存待用（≤ -70°C）。
產(chǎn)品時(shí)間：2017-09-02
打印當(dāng)前頁(yè)Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™
Frozen-EZ酵母轉(zhuǎn)化試劑盒
【溫馨提示】：
見我司懋康生物整理的酵母雙雜交檢測(cè)（Yeast two-hybrid assay）產(chǎn)品專題。
基本描述
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母轉(zhuǎn)化試劑盒）是一款專門設(shè)計(jì)用于酵母轉(zhuǎn)化和文庫(kù)篩選的試劑盒，比目前商業(yè)或公開的文獻(xiàn)方法更快捷和更有效。本試劑盒制備的酵母細(xì)胞可立即用于轉(zhuǎn)化或凍存待用（≤ -70°C）。本試劑盒制備的細(xì)胞適用于環(huán)形和線性DNAs轉(zhuǎn)化，同時(shí)也能用于其他真菌包括C. albicans，S. pombe和P. pastoris的轉(zhuǎn)化。
產(chǎn)品亮點(diǎn)：
- 高轉(zhuǎn)化效率：每µg質(zhì)粒DNA（環(huán)形）可產(chǎn)生105 - 106個(gè)酵母轉(zhuǎn)化子；
- 制備好的感受態(tài)細(xì)胞可凍存后待用；
- 快速簡(jiǎn)單步驟于10min內(nèi)可制備酵母感受態(tài)細(xì)胞；
- 簡(jiǎn)單單一步驟，1h內(nèi)完成轉(zhuǎn)化；
- 適用菌株類型廣（S. cerevisiae, C. albicans, S. pombe, Pichia pastoris）；
- 簡(jiǎn)單方法用于多質(zhì)粒轉(zhuǎn)化；
產(chǎn)品組分：本試劑盒可做120個(gè)常規(guī)轉(zhuǎn)化或600個(gè)微量轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。試劑盒4℃一年有效。
組分 | 規(guī)格 | 保存 |
EZ1 Solution | 60ml | 0-4℃ |
EZ2 Solution | 6ml | 0-4℃ |
EZ3 Solution | 60ml | 0-4℃ |
操作流程【見下圖】：
A，感受態(tài)細(xì)胞制備
30℃，于10ml YPD肉湯培養(yǎng)酵母菌直至中數(shù)量級(jí)（~5 x 106-2 x107 cells/ml 或OD600= 0.8-1.0）。以下步驟室溫進(jìn)行。
A1，500 x g離心細(xì)胞4min，吸掉上清液；
A2，加入10ml EZ1溶液清洗沉淀。重新離心沉淀細(xì)胞，吸掉上清液；
A3，加入1ml EZ2溶液重懸沉淀細(xì)胞。
此時(shí)獲得的感受態(tài)細(xì)胞即可直接用于轉(zhuǎn)化或凍存?zhèn)溆茫?/span>≤ -70°C）。注意需緩慢凍存細(xì)胞，不可使用液氮瞬間凍存細(xì)胞。
B，轉(zhuǎn)化
以下步驟適用于新鮮制備和凍存（室溫融化）的酵母感受態(tài)細(xì)胞。
B1，取50µl感受態(tài)細(xì)胞與0.2-1µg DNA（體積少于5µl）混合；加入500µl EZ3溶液，*混合；
B2，30°C孵育45min，孵育過(guò)程中用手指輕彈或低速渦旋（如果適用于轉(zhuǎn)化DNA）2-3次讓其混勻；
B3，從上面轉(zhuǎn)化混合液中取50-150µl到適當(dāng)平板上，沒(méi)有必要沉淀或清洗細(xì)胞。、
B4，30°C孵育平板2-4天使得轉(zhuǎn)化子生長(zhǎng)。
訂購(gòu)信息：Zymo Research原裝正品，現(xiàn)貨供應(yīng)。咨詢，，：。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
T2001 | Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母轉(zhuǎn)化試劑盒） | 120 Rxns | 咨詢 |
T2001 Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ User Manual
引用文獻(xiàn)：
Plasmids were transformed with high efficiency using the Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ in the construction of synthetic yeast promoters. Researchers showed that decreasing nucleosome affinity correlated with increasing promoter strength and expression levels higher than native species. |
Curran KA, et. al. (2014) Design of synthetic yeast promoters via tuning of nucleosome architecture. Nat Commun. 5:4002. |
The Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit was used to integrate various TEF1 promoter mutants upstream of a gene in Saccharomyces cerevisiae. Efficient transformation allowed comparison of gene activity and, therefore, determination of promoter strength. |
Nevoigt, E., et al. (2006) Engineering of promoter replacement cassettes for fine-tuning of gene expression in Saccharomyces cerevisiae. Appl Environ Microb, 72(8): 5266-5273. |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠(chéng)為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表達(dá)分析
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表達(dá)分析
達(dá)分析